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发表于 2014-3-5 14:59:32 |显示全部楼层
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  原癌基因KRAS是EGFR信号通路中的重要分子之一,根据以往的研究表示,突变型KRAS基因始终处于激活状态,不受上游EGFR基因状态的影响,只有野生型(未突变型)KRAS基因受上游EGFR信号刺激的影响,这也是具有突变型KRAS基因患者对EGFR抑制剂(TKIs)治疗无效的理论基础。KRAS基因突变可以导致细胞逃逸凋亡,这种异常在胰腺癌、大肠癌、肺癌等恶性肿瘤中的发生率较高。在胰腺癌中,KRAS基因的点突变发生率高达90%以上。

  美国国立综合癌症网络(NCCN)《结直肠癌临床实践指南》(V3.2011)中明确指出:(1)所有转移性结直肠癌患者都应检测KRAS基因状态;(2)只有KRAS野生型患者才建议接受EGFR抑制剂(如爱必妥和帕尼单抗)治疗。(KRAS突变型患者相应的KRAS抑制剂尚未有任何突破性成果,目前已知的KRAS抑制剂安卓健尚未完成Ⅱ期临床试验研究,预计2015年可作为临床常规治疗肿瘤药物。)同时NCCN《非小细胞肺癌临床实践指南》(V2.2011)中也指出:当KRAS基因发生突变时,不建议使用EGFR-TKIs靶向治疗药物。此外,卫生部颁布的《结直肠癌诊疗规范》中明确提出:(1)结直肠癌行病理组织学检查,确定为复发或转移性结直肠癌时,检测肿瘤组织K-ras基因状态。(2)结直肠癌手术标本的病理报告内容和要求中应包括K-ras基因状态,确定为复发或转移性结直肠癌。如无手术切除标本可从活检标本中测定。(3)晚期/转移性结直肠癌化疗治疗前检测肿瘤K-ras基因状态,EGFR不推荐作为常规检查项目。

  在国外,美国FDA(食品药品监督管理局)已经强制要求用药前进行EGFR、KRAS等基因检测。在国内,KRAS基因检测的开展得到中国抗癌协会的倡导。在此背景下,国内相继开展了KRAS基因的检测和相应治疗,KRAS基因检测已逐渐发展为恶性肿瘤常规检测项目。目前,有关KRAS突变的检测方法很多,大部分基因突变检测技术都是基于PCR进行的。

  KRAS基因检测送检样本类型:可为新鲜肿瘤组织(提供新鲜组织及RNA保存液)、新鲜肿瘤组织经快速液氮冷冻后冻存的组织或中性福尔马林固定石蜡包埋的组织。需要切一张切片经常规苏木素伊红(HE)染色确认肿瘤组织以及胸腹水。

  KRAS基因检测方法:常用方法为直接测序法和ARMS法,其中ARMS法是目前先进的方法,具有高特异性及高灵敏度的特点,其灵敏度较直接测序法高,可检测样品中1%—0.1%的突变基因,在欧洲已被广泛应用于临床检测。需要特别注意的是,规范的检测应在标准化的、有严格分区的实验室进行,避免污染造成的假阳性,且所有检测均应设立阳性对照和阴性对照。

  KRAS基因检测的必要性:(1)正常人血中检出KRAS基因异常,提示存在肿瘤易感性;(2)良性肿瘤患者若检出KRAS基因突变,提示有恶变的可能;(3)大量研究表明,KRAS基因突变阳性,即使病理组织学诊断淋巴结转移阴性,癌症复发的可能性也很高;(4)无KRAS基因突变的肺癌、结直肠癌等肿瘤患者,经抗EGFR靶向药物治疗疗效明显。通过检测KRAS基因突变状态可以筛选用药人群,实现肿瘤患者的个体化治疗,延长患者生存期。

  KRAS基因检测费用说明:由于KRAS基因突变检测尚未通过国家药监局的审批,各地物价局没有相应的收费标准(针对KRAS基因12,13,61三个位点的检测价格为2000-4000不等),因此目前患者都是自费进行检测,这限制了很多有需求的患者进行检测。不过,中国抗癌协会正在推广KRAS基因检测项目,其进入医保指日可待。

  (参考源:NCCN《结直肠癌临床实践指南》;卫生部结直肠癌诊疗规范(2010年版);医师网)


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mimo      

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